FICHA TÉCNICA
PROTOXKIT F^®

Microbioensayo de 24h para determinar la toxicidad crónica de compuestos puros, efluentes, sedimentos, aguas superficiales, subterráneas y residuales.

Cada PROTOXKIT F contiene todos los materiales necesarios para efectuar seis pruebas crónicas (multigeneracional) de toxicidad, con el protista ciliado de agua dulce Tetrahymena thermophila.

Los ciliados son componentes muy importantes de la micro fauna en comunidades bénticas y juegan un papel clave en el reciclaje de la materia orgánica. Después de las bacterias, son el segundo grupo de biota más importante en lodos activados de plantas de tratamiento de aguas residuales.

El kit contiene instrucciones fáciles de seguir e ilustraciones detalladas para efectuar pruebas de búsqueda de rango de toxicidad y pruebas definitivas, determinando la CE50 en 24h. Los organismos de ensayo incluidos en el kit están en una “fase estática” de crecimiento en un medio muy específico que permite que sobrevivan por varios meses a temperatura ambiente sin perjudicar su buena condición fisiológica.

Principio y criterio de la prueba
•    Este bioensayo se basa en la conversión del sustrato o alimento en biomasa de ciliados, medida mediante lecturas de densidad óptica (DO).
•    La inhibición del crecimiento de los cultivos bajo estrés de toxicidad se refleja por la permanencia de la turbidez del sustrato-alimento suspendido (con una consecuente mayor DO) en comparación con el control.
•    La inhibición media de crecimiento después de 24h de exposición a 30° C se determina y expresa como la CE50 24h. Efectos tales como NOEC y LOEC pueden calcularse con programas específicos para tratamiento de datos.

Reproducibilidad
•    La variabilidad asociada al mantenimiento de stock vivo en el laboratorio se evita gracias al cultivo de alta calidad de los ciliados, de forma axénica, uniforme, llevado a cabo bajo condiciones controladas.
•    El PROTOXKIT F contiene celdas espectrofotométricas descartables estándar en las que se mide directamente la DO del sustrato alimento.
•    Una prueba de control de calidad con un químico de referencia se describe en detalle para verificar la precisión y reproducibilidad.

Costo beneficio
•    Las pruebas pueden iniciarse a partir del vial con el cultivo stock, eliminando la necesidad y los costos de cultivo continuo y mantenimiento de los cultivos de los organismos de ensayo.
•    Para efectuar la prueba se requiere equipo mínimo: un colorímetro o especrtrofotómetro, una incubadora pequeña y cristalería convencional de laboratorio.
•    Se compara favorablemente con la prueba en células animales y humanas, siendo esto un potencial del PROTOXKIT F como una prueba de tamizaje en toxicología humana.
•    La vida de anaquel de los cultivos stock se garantiza por varios meses si se almacena adecuadamente, reduciéndose las complicaciones para la calendarización de las pruebas.

Contenidos
•    Vial con cultivo stock, jeringas estériles para transferir los ciliados, tubos con sustrato y medio reconstituyente, celdas espectrofotométricas para diluir el cultivo stock y para llevar a cabo las pruebas, y gradillas para las celdas.
•    Procedimiento estándar operacional detallado, protocolo abreviado, hojas para apuntar resultados y par calcular gráficamente la CE50.
•    Hoja de especificaciones con el número de lote del stock de ciliados, de los medios y otra información pertinente.

Amigable al usuario
•    Los bioensayos pueden iniciarse en cualquier momento a partir del cultivo stock.
•    Efectuar la prueba sólo implica lecturas fotométricas simples de densidad óptica al inicio y al final de la prueba.
•    Tiempo total para montar y leer el bioensayo de aproximadamente 1 hora.
•    Una hoja de cálculo para estimar la CE50 se puede obtener si el usuario lo solicita.

Sensibilidad
•    Comparable con la de otros ciliados presentes en lodos activados y por tanto un buen indicador de peligros tóxicos para el afluente de plantas de tratamiento de aguas residuales.
•    Se compara bien con la de líneas celulares humanas y animales, siendo un potencial uso del PROTOXKIT F como una prueba de tamizaje para ecotoxicología humana.

Validación
•    La inhibición de crecimiento NOEC determinada con el PROTOXKIT F son umbrales ecológicamente significativos para la protección de comunidades de microfauna béntica de protozoos y para el buen funcionamiento del componente ciliado en lodos activados.
•    Existe una base de datos muy extensa sobre el efecto de muchos químicos sobre la especie relacionada Tetrahymena pyriformis.
•    La directriz del bioensayo con Tetrahymena está en desarrollo prioritario en la OCDE.

A petición del usuario se puede proporcionar una lista de referencias selectas.

Todos los materiales incluidos en el PROTOXKIT también pueden obtenerse por separado.

PROTOXKIT F es una marca registrada de MicroBioTests, Inc., Mariakerke (Gent), Bélgica.